1. Използвайте онлайн филтри
Вграденият филтър се поставя между автосемплера и хроматографската колона (или защитната колона). Обикновените вградени филтри са разделени на вградени филтри от неръждаема стомана със сменяема фрита (0.5 μm или 0.2 μm) и PEEK за еднократна употреба. За онлайн филтри, изработени от различни материали, обикновено трябва да се избере ситова плоча с по-малък отвор от фритовата плоча на колоната, така че ефективно да се прихващат частиците, които могат да блокират хроматографската колонна фритова плоча. След като се установи, че налягането на инструмента започва да се увеличава, възможно е филтърната фрита да започне да се запушва и трябва да я актуализираме, преди да се запуши напълно.
Вградените филтри функционират точно като мембраните, но не изискват допълнителна работа. След центрофугиране на пробата все още е възможно малко количество частици да влязат в инструмента, а остатъчните частици могат да бъдат прихванати от вградения филтър, разположен пред хроматографската колона. Освен това предимството на онлайн филтъра е, че е лесен и лесен за подмяна. Като цяло са необходими само 5 минути, за да го смените и може да бъде рестартиран за употреба и не е необходимо да отделя време за пренастройване или калибриране. Друго предимство е, че вграденият филтър може също да филтрира частиците, генерирани от стареещото износване и разкъсване на някои части в инструмента. Силно препоръчвам всеки инструмент с течна фаза да е оборудван с вграден филтър. Дори ако се използва защитна колона, препоръчвам също да инсталирате вграден филтър преди защитната колона.
2. Използвайте защитна колона
Защитната колона е къса хроматографска колона, инсталирана пред хроматографската колона. Обикновено е дълъг 1-2 cm и опаковката е съобразена с опаковката на използваната колона, а размерът на порите на използваната фрита не е по-голям от този на използваната фрита в колоната. Защитната колона има две функции: (1) може да блокира частиците, които могат да блокират колоната; (2) тъй като защитната колона и набивката на колоната са съвпадащи, всички химически примеси, които могат необратимо да взаимодействат с пълнежа на колоната без пикове, ще бъдат уловени първи от защитната колона.
Използването на защитна колона определено може да удължи живота на колоната. Въпреки това, преди да помислите дали да използвате защитна колона, се препоръчва да оцените следните точки:
(1) Защитната колона не е евтина, така че помислете дали разходите за закупуване на предпазната колона могат да бъдат компенсирани от увеличения живот на колоната;
(2) Колко дълъг е животът на предпазната колона? Необходимо е да се обърне внимание кога трябва да се смени защитната касета, за да не се замърси хроматографската колона, тъй като смяната е твърде късно;
(3) Как да промия защитната колона? При промиване защитната колона и хроматографската колона трябва да се измият отделно, за да се избегне промиването на примесите, натрупани в защитната колона, в хроматографската колона;
(4) Не очаквайте да увеличите ефективността на колоната поради добавянето на 1-2 cm предпазна колона. Въпреки че инсталирането на защитна колона е подобно на увеличаването на дължината на колоната, използването на защитна колона също добавя два конектора и свързващи тръби, което ще намали ефективността на колоната на инструменталната система, така че би било добре ефективността на колоната без предпазител колоната може да се поддържа.
Излишно е да казвам, че използването на предпазни колони със сигурност може да удължи живота на колоната, но се препоръчва всяка лаборатория да оцени необходимостта от предпазни колони от гледна точка на икономиката и усилията. Дори и с предпазна колона, бих препоръчал да поставите филтър на линия между защитната колона и автоматичния семплер, в края на краищата смяната на вградения филтър е по-евтина от смяната на защитната колона и увеличава живота както на защитната колона, така и на колоната .
3. Не въвеждайте необработени проби
Със или без предварителна обработка се препоръчва всички проби да бъдат филтрирани или центрофугирани преди инжектиране. Например, когато пробата се филтрира през филтърна мембрана, за да се отстранят частиците и по този начин да се намали запушването на фритата на хроматографската колона, размерът на порите на филтърната мембрана трябва да бъде по-малък от размера на порите на фритата на хроматографската колона. Обикновено хроматографските колони с частици по-големи от 3 μm използват 2 μm фрита, хроматографските колони с 3 μm частици използват 0.5 μm фрита, а колоните с частици по-малки от 3 μm обикновено използват 0.2 μm фрита, така че общите 0.45 μm филтри могат да се използват основно във всички хроматографски колони с изключение на частици под -2 μm; за колони с частици под -2 μm обикновено се използват филтри с 0.2 μm пори. Повечето филтърни мембрани са предварително опаковани и могат да бъдат директно свързани към спринцовка за филтриране или да се използват като филтърна плоча в 96-плоча за ямки.